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【摘要】目的探討冬蟲夏草(蟲草)及其與維生素C(VitC)、核酸組成的復方液對大鼠鎘致腎毒性的改善作用。方法清潔級SD大鼠24只,按體質量配伍分3組:單染鎘組、蟲草干預組、復方蟲草干預組。3組以CdCl2(以Cd計1mg/kg體質量)皮下注射染毒,每周5次,共12次;染毒后蟲草干預組給予蟲草液,復方蟲草干預組給予復方蟲草液(蟲草+核酸+VitC),單染鎘組以等量蒸餾水,灌胃,連續3周。結果蟲草干預組與復方蟲草干預組血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)均明顯低于單染鎘組(P<0.05),復方蟲草干預組血清BUN顯著低于蟲草干預組(P<0.05);蟲草干預組與復方蟲草干預組血鎘、腎鎘含量均明顯低于單染鎘組(P<0.05);干預組每日尿鎘排出量均明顯高于單染鎘組(P<0.05);復方蟲草干預組腎鎘含量顯著低于蟲草干預組(P<0.05)。結論蟲草對鎘中毒性腎損傷有較明顯的改善作用,聯合核酸和VitC效果更佳,機制可能與促進鎘排出有關。

【關鍵詞】冬蟲夏草核酸類維生素C

隨著現代工業的發展,鎘污染日益嚴重,其防治研究越來越受到醫學界重視。研究表明,鎘中毒與鎘直接造成腎臟細胞毒性及機體氧化損傷有關[1],目前鎘中毒防治仍以藥物為主。冬蟲夏草(簡稱蟲草)作為傳統的強壯滋補中藥,能增強免疫系統功能,提高機體免疫力,而且可明顯促進體外培養腎小管上皮細胞的生長[23]。核酸和維生素C(VitC)具有較強的協同抗氧化作用[4],核酸還可促進細胞增生和分化。筆者研究上述3種物質對大鼠中毒性腎損傷的影響,為防治鎘中毒途徑提供新線索。

1材料與方法

1.1動物與分組雄性SD大鼠24只,體質量(206.65±13.36)g,由上海西普爾必凱公司提供(合格證號:醫動字第02492號)。按體質量配伍分成3組:單染鎘組、蟲草干預組、復方蟲草干預組,每組8只。鎘中毒模型制備參照文獻[5]:3組均以氯化鎘(CdCl2,以Cd計1mg/kg)皮下注射染毒,每周5次,共12次。干預方法:蟲草干預組以25mg／kg蟲草混懸液,復方蟲草干預組以復方蟲草液(25mg/kg蟲草+核酸+VitC),單染鎘組以等量蒸餾水,每天1次灌胃,連續3周。

蟲草(福建省食用菌公司),核酸(福州正分子公司,DNA23%,RNA77%)。

1.2樣本采集

1.2.1尿液動物處死前按組置于代謝籠中,收集24h尿液。

1.2.2血液動物處死前晚9:00撤食,次日晨斷頭,立即取全血0.5mL用于測血鎘,血清用于測定尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)。

1.2.3腎臟動物處死后立刻取出左側腎臟,稱質量,消化后測鎘含量。

1.3觀察指標與測定方法尿Cr用堿性苦味酸比色法測定;血清BUN、Cr用全自動生化分析儀(EOSbravo,意大利HospltexDiagnostecs公司)測定;其余樣本以1∶4硝酸(優級純)與高氯酸(優級純)混合液消化,雙蒸水定容,用火焰原子吸收分光度法測含鎘量。

1.4統計學處理應用SPSS12.0軟件對數據進行統計處理。

2結果

2.1血清BUN、Cr水平兩干預組BUN、Cr低于單染鎘組(P<0.05),復方蟲草干預組低于蟲草干預組(P<0.05,表1)。表1大鼠血清尿素氮和肌酐水平n＝8.與單染鎘組比較,☆:P<0.05;與蟲草干預組比較,#:P<0.05.

2.2血、尿、腎鎘含量、尿鎘排出量3組血鎘、尿鎘日總排出量、腎鎘含量有差別(P<0.05)。蟲草干預組、復方蟲草干預組尿鎘含量有增加趨勢,但差別無統計學意義(P>0.05)。蟲草干預組和復方蟲草干預組的血、尿、腎鎘含量與單染鎘組比較差別有統計學意義(P<0.05),兩干預組腎鎘含量比較差別有統計學意義(P<0.05,表2)。表2大鼠血、尿、腎鎘含量、尿鎘排出量

3討論

3.1鎘致腎毒性鎘進入人體后主要分布于肝、腎、骨骼、血液等,腎臟是鎘最主要的蓄積部位和靶器官之一,慢性接觸鎘所致的腎損傷是對人體的主要危害[1]。本研究應用中國傳統補腎中藥冬蟲夏草及冬蟲夏草與VitC、核酸復方液對染毒后大鼠進行干預,觀察對大鼠鎘致腎損傷的影響。

3.2蟲草對鎘致腎毒性的改善作用實驗結果表明,蟲草可以明顯降低血清BUN、Cr水平,并且降低腎鎘含量,提示蟲草對鎘引起的腎功能損害有明顯的保護作用。鎘對腎臟的損傷主要造成腎小管上皮細胞的壞死,繼而引起腎小球的損傷,其產生的腎臟毒性與鎘造成氧化損傷和微量元素的平衡紊亂有關[5];蟲草對腎功能的保護作用可能與蟲草可以促進體外腎小管上皮細胞的增生,保護腎小管的功能,從而減緩鎘引起的腎功能損傷,以及它具有抗脂質過氧化、提高機體免疫力有關[3,56]。此外,蟲草含有豐富的無機元素（如鈣、鋅、銅）,可能對腎臟微量元素平衡紊亂有拮抗作用[7]。

鎘在體內首先經血液進入肝臟,并誘導肝臟合成金屬硫蛋白(MT),MT與鎘絡合為鎘金屬硫蛋白(CdMT)并可能以CdMT的形式通過血液運轉到腎臟;血中CdMT進入腎小球濾液后,部分被腎小管上皮細胞重吸收,未被吸收的部分則從尿中排出[8]。本實驗結果單染鎘組血鎘含量明顯高于干預組,說明蟲草可以降低血鎘的含量。蟲草干預組與復方蟲草干預組每日尿鎘排出量明顯高于單染鎘組(P<0.05),兩干預組腎鎘含量均明顯低于單染鎘組,且其每日尿鎘排出量明顯高于單染鎘組,提示冬蟲夏草可能有一定的促排鎘作用。而蟲草干預組與復方蟲草干預組每克肌酐尿鎘含量雖比單染鎘組高,但在統計學上差異卻無顯著性,這可能與尿鎘指標個體差異較大、樣本量太小或尿樣收集時間較短有關。對腎小管上皮細胞損害的保護作用,需繼續病理學研究。

3.3蟲草與蟲草+VitC+核酸對鎘致腎毒性改善作用比較研究發現,復方蟲草干預組血清BUN、腎鎘含量比蟲草干預組低,說明蟲草+VitC+核酸比單一使用蟲草對腎功能的保護效果更好,其機制可能與VitC具有抗氧化、解毒作用,核酸具有清除自由基和抗氧化、促進細胞增生和分化作用有關[9],從而保護腎臟免受鎘性損傷,促進腎小管上皮細胞盡快修復，該機制尚需深入探討。