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第1篇

關(guān)鍵詞 水生動物免疫學(xué)；水生動物醫(yī)學(xué)專業(yè)；教學(xué)措施

中圖分類號 G642 文獻標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）08-0283-01

隨著水生動物執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試制度的建立，我國開始了新型水生動物疫病防控體系的構(gòu)建。緊接著，經(jīng)教育部批準(zhǔn)，上海海洋大學(xué)和大連海洋大學(xué)相繼開設(shè)了水生動物醫(yī)學(xué)本科專業(yè)。國內(nèi)其他水產(chǎn)高等院校內(nèi)部也開始嘗試該專業(yè)建設(shè)，但截至目前，僅有上述2所高等院校獲批開設(shè)此專業(yè)。免疫學(xué)作為生命科學(xué)最活躍的學(xué)科之一，是醫(yī)學(xué)類專業(yè)開設(shè)的一門重要基礎(chǔ)課程，強調(diào)創(chuàng)新能力和實踐能力的培養(yǎng)[1]。那么，與水生動物醫(yī)學(xué)專業(yè)所對應(yīng)的水生動物免疫學(xué)教學(xué)與傳統(tǒng)的水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)有何區(qū)別和變化，值得從事相關(guān)教研工作的教師不斷思考。筆者作為水生動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的專業(yè)課教師，現(xiàn)將關(guān)于水生動物免疫學(xué)在水生動物醫(yī)學(xué)專業(yè)中的教學(xué)措施總結(jié)如下。

1 以執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試為教學(xué)導(dǎo)向

2009年，農(nóng)業(yè)部在5個省、市、自治區(qū)進行了執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試試點工作，并于2010年在全國范圍執(zhí)行。2011年，執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試增設(shè)水生動物類。我國的執(zhí)業(yè)獸醫(yī)體制正在與國際接軌[2]，培養(yǎng)與之適應(yīng)的水生動物醫(yī)學(xué)專業(yè)人才是各高校的責(zé)任。水生動物免疫學(xué)是執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試的基礎(chǔ)理論考試內(nèi)容，在日常授課中應(yīng)以執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試作為一定導(dǎo)向，并與之適應(yīng)。

此前，大連海洋大學(xué)僅在研究生階段開設(shè)了水生動物免疫學(xué)課程，其教學(xué)內(nèi)容和方式不適于本科生教學(xué)，更無法貼近執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試制度。針對以上問題，大連海洋大學(xué)水生動物醫(yī)學(xué)教研室對水生動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的免疫學(xué)課程進行了理論教學(xué)和實驗教學(xué)改革，完善課程考核評級體系，加強學(xué)生的專業(yè)素養(yǎng)和技能培養(yǎng)。希望通過更貼合實際的教學(xué)改革和實踐，培養(yǎng)更多合格的水生動物類執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師。

2 結(jié)合專業(yè)特點，優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容

目前，無論是獸醫(yī)免疫學(xué)還是水生動物免疫學(xué)，其基礎(chǔ)理論、實驗內(nèi)容和實驗方法主要來源于目前完善的醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)體系。然而，水生動物的免疫系統(tǒng)相對于人類以及家畜，其差異十分明顯。籠統(tǒng)地照搬人醫(yī)以及獸醫(yī)的基礎(chǔ)理論和實驗內(nèi)容應(yīng)用于水生動物醫(yī)學(xué)的免疫學(xué)教學(xué)，并不能很好地為初學(xué)者打好理論基礎(chǔ)，致使其在以后的學(xué)習(xí)深造和工作中難以提高。

為此在水生動物免疫學(xué)的講授過程中，在借鑒基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)理論的同時，結(jié)合水生動物醫(yī)學(xué)的專業(yè)特色，詳細(xì)講述不同分類地位的水生動物免疫學(xué)特點，以及其免疫學(xué)研究成果，同時對相應(yīng)物種的免疫學(xué)研究進行綜述。當(dāng)然，有學(xué)者認(rèn)為關(guān)于水生動物免疫學(xué)最新研究的講解更適合研究生教學(xué)。但筆者認(rèn)為，在本科生教學(xué)中高度總結(jié)，合理歸納，將最新的研究成果引入生活，并非籠統(tǒng)照搬實驗結(jié)果和學(xué)術(shù)概念，會取得較好教學(xué)成果。在教學(xué)實踐中發(fā)現(xiàn)，學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中并未感到枯燥乏味，相反，學(xué)生視野充分拓展，研究興趣濃厚，部分學(xué)生要求提前進入科研實驗室進行創(chuàng)新學(xué)習(xí)。

3 采取案例式教學(xué)，培養(yǎng)學(xué)生濃厚興趣

水生動物免疫學(xué)的授課內(nèi)容比較抽象，并且對學(xué)生的生物化學(xué)、分子生物學(xué)以及細(xì)胞生物學(xué)的理論知識儲備要求較高。一味地采用傳統(tǒng)的教學(xué)模式，學(xué)生容易厭倦、懈怠。因此，迫切需要改變傳統(tǒng)的教學(xué)模式，在進行正式課程授課之前，需要提前讓學(xué)生復(fù)習(xí)基礎(chǔ)生物學(xué)知識，在授課過程中，引入相應(yīng)的案例教學(xué)，結(jié)合案例開展理論知識的學(xué)習(xí)[3]。例如，在講授免疫球蛋白的基礎(chǔ)理論時，引入目前在魚類疾病防控中利用滅活疫苗來防控草魚出血病。對草魚在注射草魚出血病病毒（GCRV）滅活疫苗后會引起怎樣的免疫應(yīng)答進行拓展講解，以及引入魚類的主要抗體類型、特異性免疫與非特異性免疫的聯(lián)系等。

通過引入實際相關(guān)案例，提出問題，通過現(xiàn)場教學(xué)探討和回答問題的方式，將抽象的免疫學(xué)理論與實踐結(jié)合，提高了學(xué)生的W習(xí)興趣，同時更有利于學(xué)生掌握和記憶相關(guān)理論知識，體會到免疫學(xué)的實用之處和獨特魅力。

4 利用互聯(lián)網(wǎng)思維，引入微課教學(xué)

伴隨數(shù)字信息化及全球化的發(fā)展，基于互聯(lián)網(wǎng)平臺的全球教育資源程度日益提高。其中“微課”是近年來出現(xiàn)的一種新型教學(xué)模式，其教學(xué)時間靈活、形式多樣、內(nèi)容短小精強、主題突出[4]。在大學(xué)教學(xué)體系中，自主學(xué)習(xí)的時間遠多于課堂時間，利用基于互聯(lián)網(wǎng)平臺的水生動物免疫學(xué)微課教學(xué)，順應(yīng)當(dāng)前高教改革背景，更有助于提升學(xué)生對水生動物免疫學(xué)的學(xué)習(xí)興趣、培養(yǎng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)能力[5]。

目前，筆者通過學(xué)校教學(xué)改革項目支持，開設(shè)了水生動物免疫學(xué)微課教學(xué)課程。學(xué)生通過教學(xué)內(nèi)容少、問題聚集、主題突出、內(nèi)容更加精簡、更容易掌握的微課形式，利用碎

片化時間自主學(xué)習(xí)，教學(xué)效果提升顯著。例如：在講授魚類適用性免疫系統(tǒng)時，由于學(xué)生學(xué)習(xí)了魚類主要免疫球蛋白IgM的微課視頻，雖然學(xué)習(xí)時間較短，但形式非常新穎，學(xué)生對免疫球蛋白的產(chǎn)生以及魚類免疫系統(tǒng)和人類免疫系統(tǒng)的區(qū)別有了更加深刻的認(rèn)識，教學(xué)效果十分良好。

5 結(jié)語

總而言之，隨著我國水產(chǎn)動物養(yǎng)殖數(shù)量和規(guī)模的擴大，我國已成為世界上水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量最大的國家，但由于各種病害頻發(fā)，免疫防治目前成為水產(chǎn)動物疾病防控的熱點，被認(rèn)為是控制水產(chǎn)動物疾病和減少環(huán)境污染的有效途徑[6]。可見，水生動物免疫學(xué)在水生動物醫(yī)學(xué)專業(yè)中具有重要的地位和作用，作為水生動物免疫學(xué)方向的專業(yè)教師，在新課程改革背景下，在新專業(yè)的迫切需求下，構(gòu)建更符合實際、更高效的專業(yè)教學(xué)已刻不容緩。如何有效地進行新專業(yè)教學(xué)，以提高學(xué)生的業(yè)務(wù)水平和就業(yè)能力，是目前相關(guān)高校需要積極探索和解決的問題[7-10]。

6 參考文獻

[1] 韓存志.免疫學(xué)在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)發(fā)展中的作用：香山科學(xué)會議第173次學(xué)術(shù)討論會[J].中國基礎(chǔ)科學(xué)，2002（3）：5-8.

[2] 但學(xué)明，劉麗，孫媛，等.以執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試為導(dǎo)向的水產(chǎn)動物疾病學(xué)教學(xué)改革初探[J].中國獸醫(yī)雜志，2014（3）：99-101.

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[4] 程志波.大學(xué)公選課微課教學(xué)設(shè)計研究[J].煤炭高等教育，2015（1）：48-51.

[5] 李文堅.微課開放大學(xué)一種新的教學(xué)形式[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2015（29）：231-232.

[6] 肖克宇.水產(chǎn)動物免疫學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2011.

[7] 王蓓，王忠良，蔡雙虎，等.結(jié)合水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)特色提高水生動物免疫學(xué)教學(xué)質(zhì)量[J].中國教育技術(shù)裝備，2015（6）：71-73.

[8] 王蓓，魯義善，蔡雙虎，等.英國《動物免疫學(xué)》教學(xué)模式對我國水生動物免疫學(xué)教學(xué)改革的啟示[J].教育現(xiàn)代化，2017（6）：1-3.

第2篇

[關(guān)鍵詞]免疫血清；免疫；免疫學(xué)試驗；效價

[中圖分類號]R392.7

[文獻標(biāo)識碼]B

[文章編號]1674-4721(2009)12(b)-139-02

動物免疫血清的制備是一項常用的免疫學(xué)實驗技術(shù)，廣泛用于臨床診斷、治療和預(yù)防中，為教學(xué)、科研、檢驗之常用。在醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)中，形象、直觀、簡易的直接凝集反應(yīng)有助于學(xué)生了解抗原、抗體及抗原抗體間的免疫反應(yīng)等抽象的概念，免疫血清的質(zhì)量直接影響實驗的特異性和敏感性。因此，制備高質(zhì)量的免疫血清是建立高水平檢測方法的前提條件。但免疫血清的制備較復(fù)雜，且需學(xué)生動手操作，用量較大，為達到這一目的，除了具備理想的免疫原外，還需要選擇適宜的動物和設(shè)計有效可行的免疫程序或方案。通過多年的工作實踐，筆者制備了高效價、高特異性、高親和性的動物免疫血清，既經(jīng)濟又方便，供教學(xué)、科研所用，提高了實驗的開出率。

1　方法與結(jié)果

1.1　動物的選擇及飼養(yǎng)

制備抗血清的動物主要是哺乳類和禽類。羊、馬、豚鼠、兔都是常用的動物，在實驗中，選擇動物時應(yīng)考慮抗原與動物的種屬關(guān)系、抗原性質(zhì)與動物種類、免疫血清的需要量、要求以及動物個體等因素。因不同動物對同一抗原的敏感性不同，免疫時至少取用2只以上動物。選擇制備免疫血清的動物必須是適齡、健壯、無感染的正常動物，體重最好在2～3 kg，年齡6個月以上，因雌性動物在性周期的不同階段和懷孕、授乳時機體對抗原的敏感性有較大改變，所以一般挑取雄性動物。動物免疫后要認(rèn)真做好動物的編號、標(biāo)記、管理和記錄，本實驗用的動物是健康家兔。

1.2　抗原的制備

1.2.1　抗原稀釋

用滅菌生理鹽水將抗原稀釋為2mg／ml，放置4℃過夜，次日取出，與佐劑混合制成乳劑后用于動物免疫。免疫原的注射劑量隨抗原的性質(zhì)有較大差異。一般考慮抗原的免疫原性的強弱、分子量大小、抗原的純度、有無毒性及動物個體狀態(tài)、免疫途徑和時間、佐劑的使用與否等。對于純的可溶性抗原，免疫時需與等量的弗氏完全佐劑混合，其免疫劑量以動物體重計算，一次注入的總劑量以0.5 mg／kg為宜。通常免為100～1000μg／次。另外免疫周期長者可少量多次注射，免疫周期短者可大量少次注射制備高度特異性的抗血清，選用低劑量抗原短程免疫法。

免疫周期隨抗原和免疫方法的不同以及是否使用佐劑而變化。單次注射抗體產(chǎn)生緩慢，效價低，維持時間短，但抗體特異性高；多次注射無以上缺點，但抗體特異性有所降低，一般以3～4次較合適。注射間隔時間一般以1～2周為宜。間隔時間短，起不到再次免疫的作用；太長，則免疫過程延長，從而影響血清的特異性，如無佐劑時間隔2～4d，加用佐劑時可間隔10～30d。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2～4周，此后，每次加強免疫的間隔時間為2～3周。

1.2.2　佐劑和抗原乳劑的配制

1.2.2.1　佐劑的配制。弗氏完全佐劑，各實驗室的配方不盡相同，我室采用的配方如下：醫(yī)用液體石臘20 ml與羊毛脂12g混勻加熱溶化，分裝于青霉素小瓶，用紗布、線繩扎緊瓶塞。高壓滅菌，4℃保存?zhèn)溆谩Ｓ诿庖咔皽?zhǔn)備抗原乳劑制備時，以活卡介苗代替死結(jié)核菌，每毫升試劑中加入10mg活卡介苗，即為弗氏完全佐劑。

1.2.2.2　抗原乳劑的制備。本實驗選用注射器推注法：將抗原溶液和等量的完全佐劑(注意佐劑必須先加熱融化。不超過50℃)分別吸入兩個5 ml注射器內(nèi)，在兩個注射器的12號針頭間用一根長約8-12 cm的醫(yī)用無毒塑料管。將兩個注射器連接在一起(塑料管必須浸泡消毒與注射器針頭相連接)。針頭塑料管1～2 cm然后兩人相對而坐。緩緩?fù)苿俞標(biāo)ǎ构軆?nèi)溶液進入塑料管道至對側(cè)注射器內(nèi)，每次必須把管內(nèi)容物全部推出，另一側(cè)同樣操作，使管內(nèi)液體往返混合直至形成油包水乳劑為止。

制成的乳劑是否形成油包水乳劑直接影響免疫效果，因此，必須進行質(zhì)量檢查。檢查的方法：將制成的乳劑滴在涼的自來水表面，質(zhì)量合格的乳劑滴入水面保持乳滴珠完整而不分散；如進入水面后立即擴散，水面油花逐漸擴大即不合格，應(yīng)繼續(xù)乳化至合格為止。

1.3　免疫途徑、注射時間、部位及劑量

不同的免疫途徑，抗原在體內(nèi)的的代謝速度不同，對免疫系統(tǒng)的刺激強弱也就不同，因而產(chǎn)生抗體的水平也就不同。抗原的注射途徑可根據(jù)免疫動物個體的大小、抗原及抗體制備目的或要求不同，選用皮內(nèi)、皮下、肌肉、靜脈或腹腔等不同途徑免疫。本實驗對家兔使用皮內(nèi)和皮下多點注射。第1周在足、掌皮內(nèi)注射含佐劑抗原0.1ml，第2周在腹部皮下注射含佐劑抗原0.5 ml，第3周在腹部皮下注射不含佐劑抗原0.5 ml，第4周在腹部皮下注射不含佐劑抗原0.5 ml。

1.4　試血及測定抗體效價

末次注射10 d后于耳靜脈采血2 ml，分離血清進行試血。筆者選用免疫雙擴散法在56℃條件下加熱30 min滅活補體。在瓊脂板中間孔加稀釋的抗原10μl( mg／ml)，周圍孔依順時針方向，分別加入用生理鹽水或PBS按1：2，1：4，1：8，1：16，1：32和1：64的比例稀釋的動物免疫血清。經(jīng)37℃保溫24 h后觀察結(jié)果，效價在1：16以上即可決定采血。選用環(huán)狀沉淀試驗將一定濃度的抗原200μl加入到環(huán)狀沉淀管中，然后在抗原液面上加入稀釋的免疫血清，如在20 min內(nèi)，抗原與血清的交界面能出現(xiàn)“++”的沉淀環(huán)，以沉淀環(huán)的直徑、大小來判斷效價的高低。一般效價高達1：2040以上才可放血。

1.5　取血、分離、分裝及保存

免疫動物經(jīng)效價檢測合格后即可考慮取血。為減少血清中的脂肪含量，放血前可考慮停食12 h。本實驗采用心臟穿刺取血，無菌技術(shù)進行操作，動物于仰臥位固定，用食指探明心臟博動量高部位，剪去少許毛。用2.5％碘酒和75％酒精消毒后，以9號針頭在預(yù)定位置與胸部呈45。角刺入心臟，微微上下移動針頭，待血液進入針筒后，即將注射器位置固定取血。2.5kg體重的家兔一次可取血20～30ml。取血后由靜脈緩緩注入等量5％葡萄糖液以補足失血量。取血的兔子經(jīng)2～3個月休息。可再次加強免疫后取血。

1.6　分離血清及免疫血清的保存

無菌條件下將平皿或三角瓶內(nèi)的血液凝固血塊收縮后，用無菌滴管吸取血清，于3 000 rpm離心15 min。取上清液。合格后的抗血清以1：100比例加入1％的硫柳汞或5％的疊氮鈉，最后濃度分別為0.01％或0.05％，用無菌滴管將抗血清分裝小管，每管裝1ml左右。-20℃以下保存，可保存2年以上。如有條件可將血清冷凍干燥保存于4℃以下冰箱。保存時間更久。

第3篇

1．1研究對象

學(xué)院2012級動物醫(yī)學(xué)專業(yè)共有4個班，隨機選取2個班為實驗組(共57人)，2個班為對照組(共56人)。兩組學(xué)生均為2012年全國高考統(tǒng)一錄取的學(xué)生，他們在平均年齡、入學(xué)成績和基礎(chǔ)課成績間均沒有明顯差異。

1．2研究方法

兩組學(xué)生動物免疫學(xué)實驗課程的教學(xué)大綱、實驗學(xué)時、實驗項目、實驗教材、實驗場所、實驗資源、任課教師均相同，對照組采用傳統(tǒng)教學(xué)法，即以教師集中講授與示教、學(xué)生分組練習(xí)、教師巡回指導(dǎo)的方式進行。實驗組采用“任務(wù)教學(xué)法”，以酶聯(lián)免疫吸附試驗為例，其具體實施過程如下。

1．2．1任務(wù)準(zhǔn)備

實驗教師首先向?qū)W生介紹酶聯(lián)免疫吸附試驗的定義和重要性，指出該項目的實驗?zāi)康摹嶒炛攸c、難點，然后安排具體任務(wù)，介紹完成任務(wù)的途徑及最后的評價標(biāo)準(zhǔn)，對組長及成員的職責(zé)提出具體要求。安排的具體任務(wù)為:1)酶聯(lián)免疫吸附試驗的原理;2)酶聯(lián)免疫吸附試驗的分類及其用途;3)開展間接酶聯(lián)免疫吸附試驗的基本材料與試劑;4)間接酶聯(lián)免疫吸附試驗的操作步驟;5)進行間接酶聯(lián)免疫吸附試驗過程的注意事項;6)分析本組實驗結(jié)果與實驗體會。

1．2．2任務(wù)實施階段

上實驗課前一天，讓學(xué)生們通過小組成員之間討論，計劃出實驗所需的材料與試劑，在實驗指導(dǎo)教師的輔助下進行實驗準(zhǔn)備。課堂上，由實驗指導(dǎo)教師隨機指派一位學(xué)生代表圍繞實驗任務(wù)進行講解，其余學(xué)生根據(jù)講解內(nèi)容進行討論、交流。根據(jù)學(xué)生講解與討論的情況，實驗指導(dǎo)教師進行針對性地點評與總結(jié)，更正錯誤和補充不完整的內(nèi)容，并對實驗相關(guān)的重點知識進行歸納總結(jié)，然后學(xué)生開始做實驗。

1．2．3任務(wù)評價

實驗結(jié)束后，學(xué)生根據(jù)實驗結(jié)果和實驗過程中出現(xiàn)的情況，進行再次分析、討論與思考，對本次實驗進行總結(jié)，并以實驗報告的形式體現(xiàn)出來。

2教學(xué)效果評價

2．1實驗平時成績評價

根據(jù)學(xué)生上交的實驗報告中體現(xiàn)的學(xué)生分析、解決問題的能力判定實驗報告成績，作為平時成績，用統(tǒng)計學(xué)的方法比較兩組學(xué)生的平時成績。實驗組學(xué)生的優(yōu)秀率和及格率均顯著高于對照組。

2．2實驗考核成績評價

實驗教學(xué)結(jié)束后，實驗組和對照組同時進行實驗考核，用統(tǒng)計學(xué)的方法比較兩組學(xué)生的實驗考核成績，見表2。通過表2可以看出，實驗組考核成績中優(yōu)秀率和及格率均顯著高于對照組。

2．3教學(xué)效果評價

實驗教學(xué)結(jié)束后，通過調(diào)查問卷的形式，在實驗組中進行實驗效果調(diào)查評估。從任務(wù)教學(xué)法效果評價(見表3)可以得知，大部分學(xué)生均能接受任務(wù)教學(xué)法，且認(rèn)為該教學(xué)方法能活躍課堂氣氛、激發(fā)學(xué)習(xí)興趣、能提高學(xué)習(xí)的參與性和創(chuàng)造性、能培養(yǎng)分析問題和解決問題的能力、可提高團隊合作能力，并可提升綜合能力。

3討論